甘油三酯（TG）含量检测试剂盒（微量法）
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
产品货号：BA
产品规格：管/96样
产品简介：
TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。测定原理：用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成*色物质，在nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。
产品内容：
试剂一：自备，取玻璃空瓶，加入60mL正庚烷，60mL异丙醇，盖紧后混匀，4℃保存。
试剂二：液体3mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体3mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂五：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂六：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：粉剂×1瓶，临用前加5mL试剂一，即1mg/mL甘油三酯标准溶液，4℃保存。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、微量比色皿/96孔板、双蒸水和mL玻璃空瓶。
操作步骤：
一、TG的提取：
1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，g，4℃离心10min，取上清待测。
2、细胞、细菌：先收集-万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），g，4℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接测定。
二、测定操作：
1.分光光度计预热30min，调节波长到nm，蒸馏水调零。
2.水浴锅预热到65℃。
加试剂一后充分混匀，再加试剂二，剧烈振荡30s，静置，待分层后取上层溶液15L，置于新的EP管中。
3．甘油三酯含量测定：
转移至微量比色皿/96孔板测定nm处吸光度，记为A空，A标和A测。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
三、计算公式：
1.血清（浆）中甘油三酯含量：
TG含量（mg/dL）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）
=（A测－A空）÷（A标－A空）
C标准品：标准品浓度，1mg/mL；：单位换算系数，1dL=mL。
2.组织中甘油三酯含量：
(1)按样本蛋白浓度计算
TG含量（mg/mgprot）=C标准品×V×（A测－A空）÷（A标－A空）÷（Cpr×V）
=（A测－A空）÷（A标－A空）÷Cpr
(2)按样本鲜重计算
TG含量（mg/g鲜重）=C标准品×V×（A测－A空）÷（A标－A空）÷W
=（A测－A空）÷（A标－A空）÷W
C标准品：1mg/mL；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g;V：加入试剂一的体积，1mL。
3.细胞、细菌中甘油三酯含量：
TG含量（mg/cell）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）÷细菌或细胞密度
=（A测－A空）÷（A标－A空）÷细菌或细胞密度
C标准品：标准品浓度，1mg/mL；细菌或细胞密度：cell/mL
注意事项：
1.试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2.加试剂二后需剧烈震荡，使待测液中甘油三酯得到充分提取。
3.最低检出限为mol/L。
