中文名称:人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)酶联免疫试剂盒
96T/盒
仅供科研使用,本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)含量。
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)水平。用纯化的人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D),再与HRP标记的肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D)浓度。
1、物理性能
试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气(如有漏气,不影响使用)。
2、剂量反应曲线线性
标准品剂量反应曲线相关系数r值,大于等于0.。
3、检测范围
2.5ng/L-85ng/L。
4、灵敏度
最低检出剂量小于0.ng/L。
5、精密度
精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×
批内差:取同批次试剂盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批间差:选取3个不同批次的试剂盒分别对低、中、高值定值样本进行定量测定,每个样本使用同一试剂盒重复测定10次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。
批内差:CV4.9%
批间差:CV5.8%
6、回收率
分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
7、线性
分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
8、特异性
本试剂盒识别天然和重组人肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D),经检测与其它相似物质无明显交叉反应。由于受到技术及样本来源的限制,不可能完成所有相关或相似物质交叉反应检测,因此本试剂盒有可能与未经检测的其它物质有交叉反应。
9、稳定性
经测定,试剂盒在有效期内务必按推荐温度保存,活性降低率小于5%。为减小外部因素对试剂盒破坏前后检测值的影响,实验室的环境条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可减少人为误差。
注意:使用前请检查试剂盒中试剂的标签和数量与表格是否一致。
需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、精密移液器、吸头、加样槽
3、蒸馏水或去离子水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、EP管
7、无粉一次性乳胶手套
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标