L精氨酸酶L精氨酸氨基水解酶特性 [复制链接]

L-精氨酸酶是催化水解L-精氨酸生成鸟氨酸与尿素的反应酶，一般含于产生尿素的动物(哺乳类、板鳃鱼类、两栖类、海龟类)的肝脏、肾脏、精巢中。亦作用于具有游离胍基与羧基的刀豆氨酸、真蛸碱等物质。一般含于产生尿素的动物(哺乳类、板鳃鱼类、两栖类、海龟类)的肝脏、肾脏、精巢中，作为尿素循环的一个环节而起作用。硬骨鱼类虽具有精氨酸酶，但不能形成尿素。同一种动物雄性的脏器比雌性的酶活性高。在肝细胞的核里特别多，也含于植物的种子、和霉菌中。

一、一般性质

1.反应式

最适pH为9.2~10.2。

2.米氏常数

3.专一性

此酶即可作用于精氨酸分子中游离的胍基，有可作用于羧基。并且，这种游离的氨基可被羧基所取代。此酶可水解刀豆氨酸，却不能水解4-胍基丁酸酯与6-胍基已酸酯。

4.抑制剂与激活剂

此酶需要Mn+2(Ni+2或Co+2)离子作激活剂；Hg+2、Ag+1、Zn+2、柠檬酸盐、硼酸盐与L-鸟氨酸却为抑制剂。

5.纯度要求

所需的纯度应是每毫克蛋白含70单位酶活性，而所含胰蛋白酶量应少于1%。

6.意义

在正常与异常组织新陈代谢的几个发展阶段中，精氨酸酶是颇为重要的。在某些排尿动物的肝脏中此酶含量特别高。此酶可用来测定L-精氨酸，以及使L-精氨酸降解。

7.稳定性

精氨酸酶以干燥状态保存在pH中性条件下，温度为4℃时则极为稳定。

二、测定方法

1.比色法

这些方法是基于比色测定脲的原理。其中一种方法是使用2,3-丁二酮试剂来测定脲含量。在nm处测量色度变化。

还可以通过与双乙酰单肟反应测定所生成的脲。在nm处测量吸光率的变化。

2.电化法

一种动力学法测定精氨酸酶，即采用一种透气性氨电极来测量所释放的NH3。

所加的脲酶应过量10倍，以保证产生NH3的速度与精氨酸酶活性之间成正比关系。此变异系数(CV)为2.8%。

还可使用相同的反应顺序测定精氨酸酶，所不同之处只是采用阳离子铵(NH4+)电极检测所释放的NH，并且应用了固定化脲酶。对于精氨酸酶活性在1.6至16单位范围内，仅10分钟内即可测定出结果,其变异系数为3%。