类固醇激素合成的过程类似于工厂的流水线，有不同的酶像工作人员一样在辛勤工作，通过对胆固醇分子的切割和组装，最终形成满足我们生理需要的类固醇激素。
常见的酶包括：20α-羟化酶，20、22-侧链裂解酶，3β-羟类固醇脱氢酶，17α-羟化酶，21-羟化酶，11β-羟化酶，18-羟化酶，18-脱氢酶，17、20-侧链裂链酶，17β-羟类固醇脱氢酶，芳香化酶，5α-还原酶。
20,22-侧链裂解酶：又称为胆固醇侧链裂解酶。是一种将胆固醇转化为孕烯醇酮的线粒体酶。这是所有哺乳动物中由胆固醇生成各种甾类激素的第一步反应。
17α-羟化酶，17,20-侧链裂解酶：CYP17A1全称为cytochromeP，family17，subfamilyA，polypeptide1（细胞色素Pc17α），也被称为17α-羟化酶，17,20-侧链裂解酶。细胞色素P酶是一类催化药物代谢、胆固醇和类固醇合成的单加氧酶。CYP17A1是该酶家族成员之一，定位于细胞内质网及微粒体，在全身各组织器官都有表达，其中肝和肾表达量较多。CYP17A1同时具有17α-羟化酶，17,20-侧链裂解酶的活性。
17α-羟化酶存在于睾丸、肾上腺的微粒体部分，与17,20-侧链裂解酶类似，CYP17缺乏同时累及肾上腺和性腺，有两种缺乏类型：①17α-羟化酶和17,20-侧链裂解酶活性均缺乏；②单纯17,20-侧链裂解酶活性缺乏，罕见。为常染色体隐性遗传。
3β-羟类固醇脱氢酶：3β-hydroxysteroiddehydrogenase，3β-HSD。3β-羟类固醇脱氢酶主要表达于肾上腺、睾丸、卵巢。其缺陷可导致盐皮质激素、糖皮质激素及性激素不同程度的合成减少，进而出现肾上腺皮质功能不足及性腺发育不全甚至假两性畸形的临床表现。
17β-羟类固醇脱氢酶：17β-hydroxysteroiddehydrogenase，17β-HSD。是一类NAD（P）H/NAD（P）+依赖的氧化还原酶，其主要功能是参与性激素的代谢，通过调节细胞内甾体类激素水平，从而在生殖系统中发挥重要作用。
21-羟化酶：CYP21即细胞色素C羟化酶，它通过*素蛋白-P还原酶从NADPH获得电子，将17-羟孕酮氧化为11-去氧皮质醇，亦可催化孕酮转变为11-去氧皮质酮。某些基因突变可引起21-羟化酶活性降低，或完全无活性。21-羟化酶缺乏症的临床表现分三型：①单纯男性化型：只有皮质醇合成途径的CYP21受累，醛固酮合成途径正常。（女性男性化，男性性早熟）②失盐型：皮质醇和醛固酮两种合成途径的CYP21都受累。（水盐失衡，新生儿期死亡率高）③非经典型：无症状型，迟发型。
11β-羟化酶：11β-hydroxylase，存在于肾上腺皮质细胞的线粒体内膜。基因在束状带表达，表达过程主要受ACTH调节。11β-羟化酶缺乏症临床特征是低肾素性高血压。
18-羟化酶：18-hydroxylase，存在于肾上腺的线粒体中，是在甾类的C环和D环间18位的甲基上引入羟基的酶。需要分子态氧与NADPH。可催化皮质酮生成醛固酮。
芳香化酶：是细胞色素P酶系中的一种，可以催化雄烯二酮、睾酮脱去19位碳并使A环芳构化，分别形成雌酮和雌二醇，它是雌激素生物合成的限速酶。
5α-还原酶：催化睾酮转化为活性更强的双氢睾酮的还原酶。
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