治疗白癜风多少钱 http://m.39.net/pf/a_4784103.html先看一道题：对图中的黏性末端的说法正确的是 (
)A.图甲、乙、丙中的黏性末端是由两种限制性核酸内切酶切割产生的B.图乙中的酶切位点在A与G之间C.如果图甲中的G突变为A,则该限制性核酸内切酶不能识别该切割位点D.限制性核酸内切酶和DNA连接酶分别作用于图中的a处和b处
解答本题的关键是明确限制性核酸内切酶、DNA连接酶的作用特点。选C。图甲中的限制酶识别序列是GAATTC,切点在GA之间;图乙中的限制酶识别序列是CAATTG,切点在AC之间;图丙中的限制酶识别序列是CTTAAG,切点在TC之间,A、B错误;如果图甲中的G发生突变,整个序列也发生改变,不能被原限制酶识别,C正确;限制性核酸内切酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键,即图中的a处,D错误。下面是3种限制酶对DNA分子的识别序列和切割位点图(箭头表示切点,切出的断面为黏性末端)。
相关叙述错误的是 (
)A.不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶的专一性B.限制酶2和限制酶3识别的序列都包含6个碱基对C.限制酶1和限制酶3切割出的黏性末端相同D.能够识别和切割RNA分子内一小段核苷酸序列的酶只有限制酶2解答本题需要明确以下两点
1)明确限制酶的作用和特点。(2)正确分析3种限制酶的特点,判断3种限制酶的共性和不同。选D。不同的限制酶有不同的识别序列和切割位点,体现了酶具有专一性;限制酶2和限制酶3识别的序列分别是CCGCGG和GGATCC,均为6个碱基对;限制酶1和限制酶3切割出的黏性末端相同;3种限制酶均不能识别和切割RNA中核糖核苷酸序列。举一反三：(·北京高考)用XhoⅠ和SalⅠ两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段,酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是 (
)
A.图1中两种酶识别的核苷酸序列不同B.图2中酶切产物可用于构建重组DNAC.泳道①中是用SalⅠ处理得到的酶切产物D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
(1)题眼:限制性核酸内切酶。(2)解题关键:限制性核酸内切酶识别的是双链DNA的特定的核苷酸序列。(3)解题思路:酶的特异性;根据不同的酶有几个酶切位点可以判断最终有几个DNA片段。选D。因为酶具有特异性,所以两种酶识别的核苷酸序列不同,A项正确;酶切产物可以用于构建重组DNA,B项正确;泳道①中有3条较短的片段和1条较长的片段,共4个片段,符合SalⅠ处理得到的酶切产物,C项正确;图中被酶切的DNA片段是双链DNA,D项错误。详细解析 通过图1可知，两种限制性核酸内切酶切割DNA分子的不同部位，说明两种限制性核酸内切酶识别的核苷酸序列不同，A正确；图2中的酶切产物是DNA分子片段，可用于构建重组DNA，B正确；观察图1可知，该DNA片段有3个SalⅠ酶切位点，故用SalⅠ处理后，可形成4个DNA分子片段，电泳后出现4条电泳带，C正确；限制性核酸内切酶作用的是双链DNA片段，因此图中被酶切的DNA片段应是双链DNA，D错误。
1.一环状DNA分子,设其长度为1,限制酶A在其上的切点位于0.0处;限制酶B在其上的切点位于0.3处;限制酶C的切点未知,但C单独切或与A或与B同时切的结果如表,请确定C在该环状DNA分子上的切点应位于图中的哪处
A.0.2和0.4处
B.0.4和0.6处
C.0.5和0.7处 D.0.6和0.9处
(1)图示信息:明确限制酶A、B的切点位置分别是0.0处和0.3处。(2)关键信息:限制酶C与限制酶A或限制酶B同时切时,可先考虑限制酶A或限制酶B先把环状DNA切开成为线状DNA分子,然后再被限制酶C切割。选A。据图表信息可知:限制酶C单独切割环状DNA分子,获得长度为0.8和0.2的两个片段,可推知限制酶C有2个切割位点,而限制酶A只有1个切割位点,且位于0.0处。又知限制酶C与限制酶A同时切割时,获得2个0.2和1个0.6的片段,因此以限制酶A切割点向左或向右推测,可得知限制酶C的切割位点可能为0.2、0.4或0.6、0.8处。再根据限制酶C与限制酶B同时切割时,获得2个0.1和1个0.8的片段,可推知限制酶C的切割位点可能为0.1、0.2或0.4、0.5处。综上分析,只有0.2和0.4两处与之前推测相吻合,选项A正确。
2.用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即个碱基对)的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端)。
若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为A.2.5和5.5 B.2.5和6 C.5.5和8 D.6和8解析选D 依图示可知，该质粒上有1个EcoRⅤ限制酶的切点、2个MboⅠ限制酶的切点，故用限制酶MboⅠ单独切割该质粒时，将产生长度为6和8的两种片段。
综合考察
(·全国卷Ⅰ节选)某一质粒载体如图所示,外源DNA插入Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活(Ampr表示氨苄青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因)。有人将此质粒载体用BamHⅠ酶切后,与用BamHⅠ酶切获得的目的基因混合,加入DNA连接酶进行连接反应,用得到的混合物直接转化大肠杆菌,结果大肠杆菌有的未被转化,有的被转化。被转化的大肠杆菌有三种,分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题
p>(1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有____________________________(答出两点即可)。(2)如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选,在上述四种大肠杆菌细胞中,未被转化的和仅含环状目的基因的细胞是不能区分的,其原因是_______________;并且____________和________________________的细胞也是不能区分的,其原因是___________________。在上述筛选的基础上,若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌单菌落,还需使用含有_______的固体培养基。(3)基因工程中,某些噬菌体经改造后可以作为载体,其DNA复制所需的原料来自____________。本题考查基因工程的相关知识。(1)质粒被选用为基因工程的载体是因为:具有一个或多个限制酶切点;具有自我复制能力;带有标记基因;对宿主细胞无害。(2)未转化的和仅含环状目的基因的细胞都不能在含有氨苄青霉素的培养基上生长,故这两种不可区分。含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的细胞在含有氨苄青霉素的培养基上都能生长,这两种也不可区分。因目的基因插入位点在四环素抗性基因上,四环素抗性基因被破坏,在获得的单个菌落中各挑取少许分别接种到含有四环素的培养基上,不能生长的为要筛选的菌落,即含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌。(3)噬菌体营寄生生活,能利用宿主细胞内的原料和场所进行自身DNA的复制和蛋白质的合成。答案
1)能自我复制、具有标记基因(2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因,在该培养基上均能生长 四环素(3)受体细胞关于限制酶的三点提醒
1)化学本质:本质上是蛋白质,发挥作用需要适宜的条件,高温、强酸或强碱均易使之变性失活。(2)种类:限制酶是一类酶而不是一种酶。(3)作用特点:具有特异性、专一性和高效性。预览时标签不可点收录于合集#个上一篇下一篇
