应同写意邀请，苏州克睿基因集团总裁刘孟元（PatrickLiu）博士在“新型生物药先进技术峰会”中做了《基因编辑与递送技术——基因治疗面临的挑战和研发策略》的报告，本文系根据报告内容整理。1
基因编辑技术的研发现状
最早的基因编辑技术，始于年的锌指核酸酶技术（ZFN），也被称为第一代基因编辑技术。锌指核酸酶技术靶向结合效率高，但细胞*性比较大，且目前专利主要被美国Sangamo公司垄断，所以自问世至今没有获得大规模的应用，也没有突破性进展。第二代基因编辑技术（TALEN），作为锌指核酸酶技术的替代品，具有与第一代相近的切割效率，细胞*性较低，构建也相对容易。第三代基因编辑技术（CRISPR/Cas9），与前两代相比，具有更准确的靶向性，设计构建也更容易，并且可以实现多基因编辑，切割效率更高，细胞*性也更小。CRISPR技术已展现出很大的应用潜力，或许会主导基因编辑的未来。但由于CRISPR问世时间比较短，临床应用不及TALEN广泛，对临床长期应用的风险评估还需要一些时间。
CRISPR基因编辑技术的原理是利用sgRNA靶向基因组的特定序列，对基因组进行定点编辑，主要有以下三种情况：
1.GenomeEditing:把基因的片段进行替代、插入或者敲除，这种情况需要双链DNA断链;2.BaseEditing:相对来说更加精细。利用脱氨酶对单个基因位点进行编辑，可以做单点突变;3.GeneRegulation：主要通过对基因调控元件进行编辑，达到激活或抑制目的基因的转录和表达;
基于CRISPR基因编辑技术，近来也诞生一些新技术，有些通过融合Cas9和HNH核酸酶的结构域，在基因组的特定位置产生双链DNA断裂（Double-strandedbreak，DSB），在相同模板链下，对基因进行插入、替换和敲除。
另外，利用Cas酶（Cas3）与CRISPR结合，系统地实现基因组大片段敲除；或通过引入基因转座酶（transposases），实现大片的基因插入。
最近，NatureCellBiology上发表了一篇由丛乐博士撰写的有关dCas9-SSAP技术的文章。丛乐博士是克睿基因的共同创始人，也是斯坦福大学的助理教授。
丛乐博士团队将DNA精准重组单链退火蛋白（SSAP）与无损伤结合DNA的dCas9系统相结合，开发出一种新型基因编辑工具dCas9-SSAP。这种技术可以在无任何DNA断裂情况下，进行长序列的基因精准编辑，能够完成上千个碱基片段的插入且无脱靶。目前已经在人类细胞上达到了两位数的编辑效率，结果十分令人欣喜。
dCas9-SSAP将会推动基因编辑技术的发展，对未来基因治疗也具有很大的潜在价值。
众所周知，基因编辑技术在生物科学领域已经得到了十分广泛的应用，基因治疗是其重要应用之一。
根据实现手段的不同，基因治疗可分为体内治疗（invivo）和离体治疗（exvivo）。随着基因编辑技术的不断创新和完善，对基因治疗的研究也受到越来越多的重视。特别是在遗传病和肿瘤治疗领域，发展十分迅速。
近几年来，临床前研究可谓突飞猛进，进入临床阶段的项目也高达数百个。
年到年基因治疗的研究状况
基因治疗迅速发展的同时，不可避免地面临着一些挑战和问题。前段时间，有几项临床实验因安全性问题被FDA叫停。基因治疗的安全性风险，比如肝*性、血栓性微血管病、免疫原性等，引起大家的
