逆转录-聚合酶链反应。
一.全称ReverseTranscription-PolymeraseChainReaction。基因组DNA的污染。使用天为时代公司的总RNA提取系统(如目录号DP和DP)，所获得的RNA的纯度高，基因组DNA污染少，用于RT-PCR系统可得到满意结果。用于反转录的弓
物可视实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发卡结构的真核细胞mRNA，三种都可。
二.Real-time，是以RNA为模板合成DNA的过程，即RNA指导下的DNA合成。此过程中，核酸合成与转录(DNA到RNA)过程与遗传信息的流动方向(RNA到DNA)相反，故称为逆转录。逆转录过程是RNA病毒的复制形式之一，需BIOG逆转录酶的催化。
三.扩展资料：首先经反转录酶的作用，从RNA合成cDNA，再以cDNA为模板，在DNA聚合酶作用下扩增合成目的片段。RT—PCR技术灵敏而且用途广泛，可用于检测细胞中基因表达水平、细胞中RNA病毒的含量和直接克隆特定基因的cDNA序列。作为模板的RNA可以是总RNA、mRNA或体外转录的`RNA产物。无论使用何种RNA，关键是确保RNA中无RNA酶和基因组DNA的污染。用于反转录的引物可视实验的具体情况选择随机引物、OligodT及基因特异性引物中的一种。对于短的不具有发夹结构的真核细胞mRNA，3种都可。
