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硝态氮检测试剂盒磺胺比色法 [复制链接]

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硝态氮检测试剂盒(磺胺比色法)

产品货号:BA

产品规格:50T

产品简介:

硝态氮是植物最主要的氮源,植物体内硝态氮含量反映了土壤中硝态氮的供应情况,可作为土壤氮肥的指标。测定植物体内的硝态氮含量,不仅能够反映出植物的氮素营养情况,而且对鉴定蔬菜和以植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

硝态氮检测试剂盒(磺胺比色法)检测原理是硝酸根还原成亚硝酸根后,与对氨基磺酸和萘胺结合,形成玫瑰红色的偶氮化合物,其颜色深浅与氮含量在一定范围内呈正比,以分光光度计测定nm处吸光度,根据NO3-反应的标准曲线将A换算成NO3-浓度,再依据上述关系式即可计算出硝态氮含量,该试剂盒主要用于测定植物组织、血液、组织样本等中的硝态氮含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

产品组成:

需自备的仪器和用品:

蒸馏水、植物组织(大豆、玉米等叶柄)、血液、尿液等、离心管或试管、离心机、比色杯、分光光度计。

操作步骤(仅供参考):

1.准备样品:

①植物样品:取正常或逆境下的新鲜植物组织0.25g,清洗干净,擦干,剪碎成1~2的碎片,加入10ml硝态氮裂解液,剧烈振荡2~4min,静置澄清后,上清液即为硝态氮提取液,4℃保存备用。

②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定,4℃保存,用于硝态氮的检测。

③高活性样品:如果样品中含有较高浓度的硝态氮,可以使用硝态氮裂解液或蒸馏水进行恰当的稀释。

2.配制系NO3-标准溶液:取NO3-标准(μg/ml)按下表继续稀释:

3.NO3-加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的硝态氮浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。

4.NO3-测定:剧烈振荡1min,静置10min,将离心管或试管中液体过量的倾入新的离心管或试管中,使部分流出管外以便去除白色粉;g离心5min,取上清液,以空白调零,分光光度计(1cm光径比色杯)测定标准管、测定管nm处吸光度(记为A标准、A测定)。

计算:

以系列NO3-标准(1-5号管)浓度(μg/ml)为横坐标,以对应的吸光度为纵坐标,制作标准曲线,根据测定管的吸光度进而计算NO3-含量。根据如下公式计算具体样品中硝态氮的含量:

植物组织样品硝态氮(μg/g)=C×V

式中:C=从标准曲线上查得的NO3-浓度(μg/ml)

V=1g组织所制备的提取液的总体积(ml),本法中为40ml。

血清、尿液等样品硝态氮(μg/ml)=C×N×VT/VS

式中:C=从标准曲线上查得的NO3-浓度(μg/ml)

VT=提取液的总体积(ml)。

N=稀释倍数

VS=测定时加入提取液体积(ml)

注意事项:

1.实验材料应尽量新鲜,如取材后不立即使用,应存于4℃。

2.NO3-Assaybuffer易挥发,请密闭保存。

3.如果没有分光光度计,也可以使用普通的酶标仪测定,但应考虑酶标仪的最大检测体积。

4.所测样品的浓度过高时,应用硝态氮裂解液或蒸馏水稀释样品后重新测定。

有效期:12个月有效。

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