选修三1.2现代生物技术专题
基因工程的第一步：获取目的基因
如何获取？
①从基因文库中获取
②PCR技术增殖
③人工合成
基因文库的概念：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
基因文库分为基因组文库和部分基因文库。
PCR技术：
（详细解释请参照课本）
基因表达载体的构建
基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步已是基因工程的核心。目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代。
必备材料：目的基因、启动子、终止子、标记基因。
启动子：一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位有了它才能驱动基因转录出mRNA。
终止子：位于基因的尾端也是一段具有特殊结构的DNA片段。
标记基因：其作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。
转化：将目的基因导入受体细胞
将目的基因倒入受体细胞是实施基因工程的第三步。
将目的基因导入微生物细胞：用钙离子处理细胞，使细胞处于种能够吸收用周围环境DNA分子的生理状态，称为感受态细胞，最后将重组表达载体DNA分子溶于缓冲液中与感受态细胞混合，在一定的温度下，促进感受态细胞吸收DNA分子，完成转化过程。
目的基因的检测与鉴定
目的基因导入受体细胞后是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。
检测方法：DNA分子杂交、分子杂交、抗原—抗体、抗虫抗病接种实验
例题:下列关于基因工程的叙述，正确的是（）。
A.基因工程的生物学原理是基因突变
B.基因工程的常用工具酶有限制酶、DNA聚合酶和载体
C.整个过程都在细胞外进行
D.通过基因工程技术能够定向改造生物的遗传性状
D项，基因工程是利用重组技术，在体外通过人工“剪切”和“拼接”等方法，对各种生物的核酸进行改造和重新组合，然后导入微生物或真核细胞内，使重组基因在细胞内表达，产生出人类需要的基因产物，或者改造、创造新特性的生物类型，故D项正确。A项，基因重组才是基因工程的生物学原理，故A项错误。B项，载体不是酶，故B项错误。C项，重组基因最后需要在细胞内进行表达，故C项错误。综上所述，本题正确答案为D。