花青素还原酶(ANR)活性检测试剂盒(货号:AKPL)
一、产品描述
花青素还原酶(ANR)是原花青素生物合成途径中的关键酶,使花色素转变为相应的顺式黄烷-3-醇,对花青素在植物组织中的积累具有重要调控作用。
花青素还原酶可催化花色素和NADPH转化为黄烷-3-醇和NADP,NADPH在nm处具有特征吸收峰,通过测定吸光值变化即可表征花青素还原酶的活性。
二、产品内容
三、产品使用说明
1.粗酶液的制备(可根据预实验结果适当调整样本量及比例)
①组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:(5-10)的比例(建议称取0.1g组织,加入1mL提取液)处理样品,冰浴匀浆,4℃g离心15min,取上清置于冰上待测。
②细菌或细胞:离心收集细菌或细胞至离心管内,按照细菌或细胞数量(个):提取液体积(mL)为(-):1的比例(建议万细菌或细胞加入1mL提取液)处理样品,冰浴超声破碎(功率20%,超声3s,间隔10s,重复30次),4℃g离心15min,取上清置于冰上待测。
2.测定步骤
①紫外分光光度计预热30min以上,调节波长至nm,蒸馏水调零。
②在离心管中依次加入下列试剂:
吸光值测定(15min内完成吸光值测定):测定nm处吸光值,记为A测定和A对照,计算A=A对照-A测定。注:每个样品均需设一个对照管。
四、注意事项
①A大于0.4或A对照大于1时,建议将粗酶液适当稀释后再进行测定,计算时相应修改;
②反应完成后,应在15min内完成吸光值的测定,不建议一次性制备多个样本;
③为保证结果准确且避免试剂损失,测定前请仔细阅读说明书(以实际收到说明书内容为准),确认试剂储存和准备是否充分,操作步骤是否清楚,且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定,过程中问题请您及时与工作人员联系。
ForResearchUseOnly.NotforUseinDiagnosticProcedures.