近一年来，基因疗法相关研究越来越多地进入到了人们眼中。目前，全球基因治疗主要分为可设计核酸酶、锌指(ZF)疗法和转录激活剂样效应核酸酶(TALEN)。接下来，我们简单了解一下，新药研发人员是如何考量运用这些基因疗法来应对慢性乙肝的。
乙肝新技术应用及局限性，简介设计核酸酶，ZF或TALEN作用机理
一、基因疗法之三种主要技术
核酸酶，它能够通过预定位点切割乙肝病毒的双链DNA，进而发挥作用。因为一旦产生双链断裂，宿主细胞的DNA修复系统，可作为非同源末端连接（NHEJ）或同源定向修复机制，将会试图修复损伤。
由于非同源末端连接（Non-homologousEndJoining-NHEJ)，它在没有供体模板的情况下容易出错，可能会降低切割末端并随机插入或延迟核苷酸，进而导致突变。乙肝病毒复制模板cccDNA，由于它具有一点典型特征，它是游离微染色体构型以及窄序列可塑性而成的，因此，这些特征也有利于成为基因编辑核酸酶的完美候选开发药物。
基因编辑的另一方向是锌指(ZF)技术。它是一种具有转录因子功能的哺乳动物蛋白质，这类蛋白质可以作为切割单链DNA的单体，为了确定双链断裂，ZF需要在目标DNA序列上，进行单体二聚化和并列。因为这种基因编辑疗法和细胞毒性，以及构建方法中遇到了困难，ZF疗法真正被应用还需时日。
最后一种是转录激活剂样效应核酸酶(TALEN)，它属于二聚体工程化核酸酶，主要是由源自黄单胞菌属细菌的DNA结合蛋白和FokI核酸内切酶结构域构成的。以往已有一些科学研究应用过TALEN技术，在体外和动物模型中，观察到了对乙肝e抗原、乙肝表面抗原、乙肝核心抗原和pgRNA以及细胞cccDNA浓度的减少。
将TALEN联合IFN-α使用之后，还观察到cccDNA进一步下降，当然这些结果主要是在体外或动物模型中被观察到，还需要更多相关进入人体临床研究的数据佐证。上一章我们给治疗性疫苗开发开了头，介绍了两个方向，我们再谈谈HBcAg疫苗、抗HBsAg抗体和HBsAg-preS疫苗的开发。
二、治疗性疫苗之HBcAg疫苗
这种治疗性疫苗，也被科学家认为是有希望的替代选择进而开发全球在研乙肝新药。HBcAg疫苗的开发初衷是，基于在能够控制HBV感染的患者中，发现了大量HBcAg特异性CD8+T细胞。抗HBsAg抗体，这种方法总体上在以往很多临床前或临床研究中，都没有观察到比较明显作用，所以我们就先不介绍这种药物开发。
小番健康结语：介绍过三种基因方法和治疗性疫苗开发后，后续我们将详细科普一下，HBV特异性T细胞疗法。这种方法也被科学家称为T细胞工程技术，且以及辐射之乙肝研究领域，这种方法主要用来克服慢性乙肝患者中特定的CD8+T细胞衰竭。