EndoS中文名是糖苷内切酶S,基因来源酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes),是一种高度特异性糖苷内切酶,可以从天然IgG重链的壳二糖核心结构之间切除N-连接糖。EndoS标记有几丁质结合域CBD,以便于从反应体系中去除。纯度在95%以上,活性高,稳定性好,无糖苷外切酶污染,无蛋白水解活性。
酶学性质
来源:微生物
分类:EC3.2.1.96
分子量:kDa(SDS-PAGE)
最适pH:5.5
最适温度:37C
底物选择性:识别双天线复杂型N-连接糖蛋白或者糖肽。
糖蛋白水解位点:从糖蛋白糖核心结构之间切除N-连接糖。
激活剂:caCl,
储存温度:-20°C
失活条件:反应混合物在85°℃孵育10min即可失活。
酶活定义:
单位酶活定义为在下述条件下,10ul的反应体系中,37°C反应1小时从5ug人源lgG中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。
技术指标:
外观:无色液体(含甘油或不含甘油)
蛋白纯度:≥95%(SDS-PAGE)
比活性:≥U/mL
应用:
糖苷内切酶S(EndoS)是一种细菌内源性β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶催化水解前两个-乙酰氨基葡萄糖之间的β-1,4键IgGFc区域的双触角络合型N-链聚糖残基。可用于从糖蛋白中去除N-糖链。
实验示例:
1.用去离子水溶解1-20ug的糖蛋白,加入1ul的10×GlycoBuffer1,用去离子水定容到10ul;2.加入1-2ul的Endos,轻轻吹打混匀
3.37°℃孵育60min;
4、用于SDS-PAGE分析或HPLC分析。