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拟南芥原生质体亚细胞定位的小细节
拟南芥作为模式植物，在生物学研究中十分重要。利用拟南芥进行原生质体相关研究，能够克服植物细胞工程领域的许多困难。原生质体细胞作为遗传转化的理想受体，拟南芥原生质体的提取与转化一些小细节，你注意了吗？
拟南芥植株的准备
取4周后抽薹前的叶片（8-10个叶片），剪取中部生长良好的叶片用刀片切成0.5-1mm宽的叶条。
原生质体的分离（酶解步骤）
酶解过程中，可每隔2小时吸5μL液体）（用剪刀剪去枪头尖部），在显微镜下观察酶解程度，若原生质体非常圆且多，说明酶解效果好。
目的蛋白要无终止密码子
GFP蛋白是指示蛋白，当目的蛋白与GFP蛋白融合到一起时，显示荧光的部位便是目的蛋白定位的部位，所以要保证两个蛋白融合为一条肽链，所以就一定要去掉目的蛋白的终止子，否则使翻译提前终止，不能使它们连接为一条肽链。
终止密码子：TAA；TAG；TGA
终止密码子要去掉，改为其他非终止密码子
引入酶切位点和保护碱基
引入酶切位点和保护碱基后，带有GFP载体上的第一个ATG到目的基因的ATG之间是3的倍数。例如使用PUC-GPF载体，全长4.5kb，引入酶切位点BamhI（GAATTC）那么保护碱基需要3个。
保护碱基要添加3个，这样才是3的倍数
附件1：拟南芥原生质体的分离与转化
附件2：水稻原生质体的分离与转化
附件3：*瓜原生质体的分离与转化
附件4：柑橘原生质体的分离与转化
如需详细的操作方法，请