1、实验前都需要准备什么?
1)要通过酶标仪测试的板子,96或者孔板。
2)如果需要在F向板内添加试剂,需要自己准备移液枪及枪头。
3)查阅资料,明确自己要使用的方法,如果需要测量固定的波长,要记录下来,以便在仪器上设置。
2、Envision酶标仪都可以测量什么?
1)光吸收Absorbance
2)荧光强度FluorescenceIntensity
3)化学发光Luminescence
4)荧光偏振FluorescencePolarization
5)时间分辨荧光Time-ResolvedFluorescence
6)Lance/ALPHA
3、仪器和软件未连接怎么办?
需要先开仪器,再打开软件。如果没有连上,关闭软件再重新打开。如果仍旧没有反应,请及时联系实验员。
4、Protocol该使用哪一个?
常用的Abs,FI,Luminscence检测,一般不自己单独保存一个程序,用F的protocol进行更改检测。由于很多人都会使用相同protocol,所以每一次检测前都要重新确认参数,以免检测错误。
5、使用时,如果protocol为灰色是什么情况?
该程序缺少对应组件,点击protocol右边按钮查看缺少的是Aperture,filter还是mirror。从仪器右边的箱子里找到相应零件,进行更换。第一次更换时需要实验员在旁边进行指导。
6、酶标仪最少可以测量的液体体积是多少?
最少要铺满要检测板子的板底。
7、酶标仪可以使用的板子类型有哪些?
以下是不同方法推荐使用的板子类型,如果有需要可以到平台进行购买。
其它种类需要拿一块儿样板到F进行确认。
8、为什么发光检测(Luminescentassay)不能使用透明微孔板?
发光的实质是自身发出光信号。因为发光反应中发射出的光是各向同性的,即光在各个方向上同等发射出来。如果一个化学反应是在透明的微孔板中的微孔中进行,光不仅从垂直方向发散,还从水平方向发散出来。因此光很容易的通过各个孔之间的间隙和孔壁,光信号较强的孔就会干扰相邻的孔。因此,化学发光测试一般不用透明微孔板。
但是,仅仅是底透的微孔板是可以被使用在发光检测中的,因为周边的信号已经被降低,但是还有一定程度的干扰。
9、如何根据实验需要选择白色微孔板或黑色微孔板?
一般原则是:荧光检测用黑色微孔板,发光检测用白色微孔板。
黑板因为会有光吸收,所以它的信号相比白板有很明显的减弱。但黑板产生的背景值较低,且能降低孔与孔之间的信号交叉干扰,可起到提高信噪比,加强荧光信号的作用。
白板首先因为非透明,与黑板一样也能降低孔与孔之间的信号交叉干扰,但白板光反射能力强,可用于增强发光检测信号并能降低背景值。而白板和黑板中的底透型,由于其底透设计,可应用于基于细胞的荧光/发光检测,并允许顶读或底读两种检测模式的应用。
补充:一般认为黑板能够降低背景,实际上,黑板固然能降低背景,但也降低了信号值。所以我们建议:基于对检测信号强弱的预期,白板用于检测较弱光信号,黑板用于检测较强光信号。黑板在信号值较高的情况下,能保持更好的线性范围。
10、酶标仪有哪些不常用的功能?
1)可以实现20-50摄氏度的温度控制;
2)自动进样;
3)单孔检测;
4)波长扫描;
5)手动导出实验数据。
11、注意事项:
1)使用时,板子的A放在仪器板架的左上角;
2)使用时,需要将板子的盖子取下再进行测量;
3)仪器使用结束后,将板架load回仪器中再关闭软件。
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