上次给大家介绍了我们公司的SOD试剂盒,今天我们来解析下CAT的使用。
这是一款简单方便,还很实惠的产品,摒弃传统的紫外法,同时不采用化学显色剂-钼酸铵显色法。格锐思生物CAT用的是一款高灵敏生物酶显色剂。设计思路与国际接轨,试剂盒内提供原理的参考来源,显得更加有理有据,科学合理!一、试剂盒原理:过氧化氢酶(CAT,EC1.11.1.6)普遍存在于植物动物组织中,其活性与生物体的代谢强度及抗寒、抗病能力有一定关系。本试剂盒提供一种简单,灵敏,快速的测定方法,即CAT催化过氧化氢产生水与氧气,剩余的过氧化氢与一种新型显色探针显色,其在nm处有最大吸收峰。通过过氧化氢的减少量来计算样本中CAT酶的活力。
二、产品特点是:
①无需使用石英比色皿或UV板:从紫外波长(nm:过氧化氢的检测波长)转换到可见波长(nm)检测;②测定稳定、灵敏度更高:传统方法通过测定过氧化氢变化量,但是过氧化氢极其不稳定,且蛋白质等组分在此紫外波长下也有光吸收,影响结果精确性。本试剂盒采用过氧化氢与一种显色探针显色,生成有色稳定物质;③微板法试剂盒内带酶标板,无需客户另外购买耗材;④多种样本验证:对高粱叶片、水稻叶片、草叶、苹果、梨、猕猴桃、小鼠肌肉组织等样本已做验证。三、样本处理:
格锐思生物提供了三种类型样本的处理方式,满足不同研究样本需求:实验案例:样本来源于国内某科研院所。客户样本测试结果
实验显色
常见问题解答:
测定管吸光值≥空白管吸光值是什么原因,该如何调整?
本试剂盒空白管应为最大值,出现测定管≥空白管吸光值则说明样本自身CAT酶活较低。可见在加完试剂二的5min反应阶段,测定管几乎无气泡产生。出现这种情况有3种解决方案:(1)取样时加大样本取样量,提取液体积不变;(2)增加样本上清液的量,并同步缩减试剂一用量;(3)加完试剂二反应5min后没有明显气泡,可延长该步骤的反应时间2.测定管几乎不显色是什么原因,检测的吸光值准确吗?
测定管几乎不显色,说明样本CAT酶活较高。注意观察在加完试剂二的5min反应阶段,测定管会产生大量(密集)气泡。若检测吸光值<0.1(<0.1后吸光值越低,准确度越差),检测结果是不精确的。遇到这样的情况,为了得到准确的结果,建议客户将样本的上清液用提取液或蒸馏水稀释后,再按说明书操作表进行检测。3.按照说明书提供的方案重新测定标曲,为什么显色却没有值?为什么结果与说明书标曲有差异?
在检测过程中,基本都存在人为误差、仪器设备误差。如果有明显颜色,吸光值却很低,建议检查以下3点:(1)检查仪器设备条件是否有误;(2)是否使用1mL光径为1cm的比色皿,检测液体的液面有没有在比色皿的三分之二以上;(3)CAT试剂二有没有按要求取用。当检测条件与吸光值均无误时,由于检测所用的酶标仪/分光光度计厂商不同,测定得到的吸光值差异一般不超过0.1;但比色皿光径不同时,检测结果会有差异(此类情况建议客户重新测定标曲)。实验中务必遵循调零比色皿与测定比色皿是同一规格的原则!4.反应时间5min,大批量操作时如何避免误差?
若一次性检测样本较多,在显色反应阶段可酌情分批操作和读值,为保证数据的精确性,显色反应阶段最好半个小时内完成。有条件的客户尽量使用排枪进行实验操作。5.试剂盒过保质期时,如何判断试剂盒能不能使用?
不管是保质期内,还是过保质期的试剂盒,建议客户先按照说明书操作表的步骤检测一下空白管,若空白管无色则代表试剂盒无效或失效。
另外,公司为满足样本量大的科研客户,我们推出了大规格包装,价格更优惠!苏州格锐思生物科技有限公司是一家生物科技企业,专注于生物、农业科研领域检测技术与检测试剂盒的研发、生产与销售。主营生理生化试剂盒、生化指标检测服务、高效液相检测服务。公司自主研发的生物代谢酶活以及理化含量检测技术与检测试剂盒,可广泛应用到农、林、食品、环保、基础医学等领域,产品适用于植物、果蔬、食品、动物组织及血清、细胞、细菌、土壤、微生物等不同种类样本。目前已在销售的生物试剂盒多种,检测服务项目近项。基本涵盖科研客户常用指标范围。其中申报发明专利四项,实用新型6项。订购-(